智立中特(武汉)生物科技有限公司

<p>名称RT-112（人膀胱癌细胞）(STR鉴定正确)</p><p></p><p>别称RT&nbsp;112;RT112</p><p></p><p>种属人</p><p></p><p>生长特性贴壁</p><p></p><p>细胞形态上皮细胞样</p><p></p><p>背景描述Established&nbsp;from&nbsp;the&nbsp;transitional&nbsp;cell&nbsp;carcinoma(histological&nbsp;grade&nbsp;G2)excised&nbsp;from&nbsp;a&nbsp;woman(age&nbsp;unknown)with&nbsp;untreated&nbsp;primary&nbsp;urinary&nbsp;bladder&nbsp;carcinoma&nbsp;in&nbsp;1973;described&nbsp;in&nbsp;the&nbsp;literature&nbsp;to&nbsp;form&nbsp;tumors&nbsp;in&nbsp;nude&nbsp;mice</p><p></p><p>生长培养基RPMI-1640＋10%FBS＋1%P/S</p><p></p><p>推荐换液频率2~3次/周</p><p></p><p>冻存条件冻存液：55%基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度：液氮</p><p></p><p>培养条件气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃</p><p></p><p>保藏机构DSMZ;ACC-418</p><p></p><p>细胞处理：</p><p></p><p>1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。</p><p></p><p>2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。</p><p></p><p>对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：</p><p></p><p>1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。</p><p></p><p>2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM&nbsp;EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。</p><p></p><p>3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。</p><p></p><p>4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。</p><p></p><p>注： 次传代推荐传代比例为1:2，以后传代比例可根据客户需要自己决定。</p><p></p><p>3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。</p><br/>